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    血清,你不能不知道的一些事情!
    2019/07/27

    要做細胞培養,首先要了解的是,要用什么樣的血清。

     

     

     

    普通的細胞培養,血清是必不可少的,當然啦,也有一些需要無血清培養。比如一些CIK細胞,不能用動物源性的血清進行培養,以免會輸到人體之后,導致產生異體免疫反應。胎牛血清(FBS)是zui常用,也是zui理想的細胞生長的補充試劑,通常優于其他類型的細胞培養血清。

     

    主要是由于血清中含有豐富的營養以及細胞生長因子,這些都是細胞生長必不可少的。那為啥不用成年牛的血清,或者新生牛的血清呢?很簡單因為胎牛體內抗體含量低,不會造成與細胞的抗體的交叉反應。一般胎牛都是取自奶牛場的小公牛,因為它們不會產奶,好吧……

     

     

     

    那問題又來了,有時候會人的細胞養出一堆黑乎乎的顆粒,很多人管這個叫黑膠蟲。但其實并沒有確定一定有黑膠蟲這種生物,而且這玩意是呈布朗運動的,就是隨機的無規則運動。有很多人認為可能這玩意是一種蛋白結晶,有的認為這是一種原蟲,但Google上是搜不到黑膠蟲的。瓦特唉ver,這玩意兒會影響細胞生長。

     

     

     

    對于這個,有很多人認為這個跟血清的產地有關系。為啥米國人要把血清分級啊,肯定是低級的引起了黑膠蟲污染,也挺難說到底是不是這樣的。嘛,那米國人為啥要給血清分級呢?因為米國農業部(USDA)認為,有個別國家沒有牛海綿狀腦?。˙SE,就是瘋牛病啦)和口蹄疫(FMD),這些國家的FBS肯定要一些。這些沒有疫情的國家包括澳洲、北美洲和中美洲,但米國農業部只允許新西蘭和加拿大的牛血清,在不進行測試的情況下進口到美國。其他國家,比如澳大利亞,墨西哥之類的中美洲國家啥的,都需要檢測使命藍舌病毒、赤坂病毒等等。而南美洲被認為是疫情嚴重地區,是堅決不允許進入米國市場的。

     

     

    從世界動物衛生組織是政府間動物衛生技術組織OIE(http://www.oie.int/animal-health-in-the-world/official-disease-status/bse/list-of-bse-risk-status/)公布的數據來看,其實美國和加拿大本身都有BSE疫情,這也真的是蠻奇怪的,沒有BSE疫情的反而是一些南美國家包括:烏拉圭、哥倫比亞、巴拉圭、秘魯、巴西、阿根廷這些反而是沒有BSE疫情的地方,但米國就是這樣任性,說什么也不進口南美的。

     

     

    但口蹄疫的疫情,南美更嚴重些。

     

    澳洲的血清就更貴一些,為啥呢?因為大家認為澳洲的血清都是被隔離在大島上生產出來的,天然,純凈(沒有進口牛),無污染。和奶粉一個道理……這樣的話,南美的血清就便宜到爆了。所以會有大批的商人,用南美血清,冒充澳洲血清。

     

    那問題來了,這樣的話會有什么樣的危害呢?

     

    說到危害,我們又要講一個概念,就是血清收集的方法以及血清制品的處理,zui關鍵的血清處理就在于過濾、去除內毒素和血紅蛋白。血紅蛋白會對細胞有很大的影響,特別是培養干細胞,使用的血清的血紅蛋白含量必須≤10mg/dl,內毒素含量也需要≤10EU/ml。過濾也需要使用從0.04μm至0.45μm范圍的濾器,一般來說,0.04μm的濾器可以過濾掉基本所有的支原體和真菌細菌,但劣質點的血清不會用這樣的濾器。這個的行業內標準是用三個0.1μm的濾器來過濾。

     

    的胎牛血清的指標大概是這樣的:

     

    1)血紅蛋白≤10mg/dl(≤20mg/dl的話也說得過去的,記住FBS越紅越嗦,就是越紅越爛;顏色越淺,等級就越高

     

    2)內毒素≤10EU/ml

     

    3)總蛋白含量:30-40mg/ml(多了就不是胎牛了,可能是新生牛血清或者成年牛血清冒充的

     

    4)產地:澳洲>北美>中美>…>南美>國產(因為好多國產都是一字記之曰“亂來

     

    質量差的血清越容易出問題。